3D-Gerüste aus Chitosan (CHI), Fibroin (SF) und Hydroxylapatit (HA) sind biokompatibel und für Anwendungen im Bereich des Knochengewebes attraktive. Daher war es das Ziel, 3D-Gerüste aus CHI, CHI/SF und CHI/SF/HA herzustellen, zu charakterisieren und ihr Verhalten in vitro zu bewerten. Die Biomaterialien wurden aus einer Lösung von CHI, CHI/SF und CHI/SF/HA in Essigsäure hergestellt und nach Abschluss der Herstellungsprozesse 7, 14 und 21 Tage lang in vitro mit SaOS-2-Zellen getestet. Die Gerüste wurden durch Röntgenbeugung, Fourier-Transform-Infrarotspektroskopie mit abgeschwächter Totalreflexion, thermogravimetrische Analyse, Differential-Scanning-Kalorimetrie, Rasterelektronenmikroskopie, energiedispersive Spektroskopie charakterisiert und Tests zur Überprüfung der Porosität, Porengröße und des Kontaktwinkels unterzogen. Die Lebensfähigkeit und Zellaktivität wurden durch MTT-Reduktion und Nachweis der alkalischen Phosphataseaktivität bewertet. Die 3D-Gerüste wurden als ungiftig und fähig zur Förderung der Zelladhäsion, -proliferation und -differenzierung eingestuft und können zur Therapie von Knochendefekten eingesetzt werden.